胰腺处于身体中心部位，获取标本诊断比较困难。如果影像学检查不能发现肿瘤，或者不能明确病灶性质，有时需要活检进一步确诊。如果一次活检未找到癌细胞，可能还需要再次活检。

FNA 是胰腺癌最常用的活检方式。活检前，患者需要禁食水、停止服药、戒烟。可以在超声内镜引导下穿透胃或十二指肠壁，进入胰腺肿瘤内部实施活检，也可以在 CT 引导下，局部麻醉后，经体表皮肤进入体内胰腺肿瘤实施穿刺。当然，如确属必要，也可以开腹手术或在腹腔镜下活检。

FNA 是一项相对成熟安全的操作，大约不到一个小时即可完成，老年人也可以接受。经皮 FNA 后，局部可能会有疼痛的感觉。超声内镜引导 FNA 后，可能会有咽部疼痛和腹胀（由于内镜充 气所致）的感觉，可迅速恢复。